線性化聚乙烯亞胺（簡稱：線性PEI）分兩種分子量25K和40K。
兩者區別:
1)PEI 25K轉染溶液通常需要幾個小時才能制備，PEI 25K含有4-1 1%的殘余丙?；?，可防止聚合物主鏈與DNA強烈結合。
2)PEI MAX 40K完全水解(完全去乙?；慕Y構意味著每批產品的表現始終如)，可以在兩個小時內轉化為即用型溶液。
3)PEI MAX 40K比PEI25K更易于使用，并且更高效，含更長連續性乙烯亞胺片段，其質子化氮水平比PEI25000提高11%以上。

分下面分別推薦一種簡單適用而高效的方法，講述如何配制濃度為lmg/mL的轉染試劑的配制。

提前準備器材:
1 L玻璃燒杯、1 L玻璃量筒、pH計、移液器、磁力攪拌棒、帶油管的真空泵
1g的PEI 25K #FSF0001或者1g的PEI MAX 40K#FSF0002、IL純水(Milli-Q@純水，注射用水(WFI)，或類似的生物級水)、1N氫氧化鈉、25mL無菌塑料吸管、一次性0.1μm, 0.2um, 0.22μm PES真空無菌過濾器、無菌高聚乙烯或聚丙烯試劑瓶。

?配制過程:
1g的PEI 25K#FSF0001→900mL水溶解→攪拌、加熱（60-80°C）→加HCl調pH到2.0左右→蓋上燒杯，攪拌3h（直至粉末完全溶解）→冷卻至室溫→加NaOH調pH到6.9-7.1→移液到量筒，加水補足至1L→真空過濾消毒→分裝，-20°C保存。
1g的PEI MAX 40K#FSF0002→900mL 水→溶解攪拌、加熱(60-80°C)→加1N NaOH調pH到6.9-7.1→移液到量筒，加水補足至1L→真 空過濾消毒→分裝， 4° C保存。
注意：加熱或加酸都有助于PEI溶解（特別是配制PEI 25K，只加熱溶解不了，需要適當加酸的），詳細用量可試加一點攪拌看看，足夠溶解就行，不一定需要加到pH那么低。

轉染液貯存和保存期:
分裝存放在無菌高聚乙烯或聚丙烯試劑瓶中PEI 25K溶液可在-20°C保存長達一年，部分解凍的溶液可在4°C保存2周，不可反復凍融。
PEI MAX 40K轉染溶液在4° C可保持其性能至少6個月效果最佳，穩定存放此溶液可能適用一年。不可反復凍融。

部分引用文獻

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(2) [IF=12.4]Self-replicating RNA nanoparticle vaccine elicits protective immune responses against-SARS-CoV-2-Molecular-Therapy-Published:April22,2023DOI:https://doi.org/10.1016/j.omtn.2023.04.021

(3) [IF=16.6]The Oligodendrocyte Transcription Factor 2 OLIG2 regulates transcriptional repression during myelinogenesis in rodents- Nature Communications volume 13, Article number: 1423 (2022)

(4) [IF=8.8]Nucleoporin Seh1 maintains Schwann cell homeostasis by regulating genome stability and necroptosis-Cell Reports 42, 112802, July 25, 2023

(5) [IF=6.7]ALIX and TSG101 are essential for cellular entry and replication of two porcine alphacoronaviruses-PLoS Pathogens Published: March 15, 2024

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