英文名 | FsRed Nucleic Acid Gel Stain (GelRed) | ||
產品編號 | FS0369 | ||
產品分類 | 核酸電泳系列 | ||
純度 | 儲存條件 | 4℃ |
產品描述
FSRed Nucleic Acid Gel Stain效果等同GelRed是一種獨特的油性大分子,不能穿透細胞膜進入細胞內。不易揮發升華,人體不會吸入。艾姆斯氏測試結果也表明FSRed在凝膠染色濃度下完全無誘變性,相對于EB的強致癌性是一種安全無毒的核酸染料。FSRed與EB具有相同的光譜特性,無需改變濾光片及觀察裝置(普通紫外凝膠透射儀),在300nm處紫外光激發檢測即可。FSRed適用于瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠電泳中的dsDNA,ssDNA以及RNA染色,可以選擇膠染法或泡染法進行染色,使用非常方便和靈活。
使用方法
一、膠染法(同EB,電泳前染色)
1.制膠時加入FSRed 核酸染料(每50mL 瓊脂糖溶液中加入5uL FSRed 10,000×水溶液)。
2.按照常規方法進行電泳。
二、泡染法(電泳后染色)
1. 按照常規方法進行電泳。
2. 用H2O將FSRed10,000×水溶液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中,制成3×染色液。(如將15uL FSRed 10,000×水溶液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。
3. 將凝膠小心地放入合適的容器中,緩慢加入足量的3×染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右,最佳染色時間根據凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對于含3.5~10%聚丙烯酰胺的凝膠,染色時間通常介于30min到1h,并隨聚丙烯酰胺含量增加而延長。
注意事項
1)此方法比較節省染料,500 uL染料大約可以做100塊 50mL的膠。FSRed兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
2)由于FSRed具有良好的熱穩定性,可以直接添加到熱的瓊脂糖溶液中而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉以保證染料充分混勻。也可以選擇將FSRed儲液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。
3)用泡染法染色時,染料用量較多。單次使用的染色液可重復使用3次左右。
4)含有染料的預制凝膠溶液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。
5)膠染法不適合預制聚丙烯酰胺凝膠,對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。
6)如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認問題是否與染料有關。如果染色后問題依舊存在,則說明問題與染料無關,請嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長的凝膠;延長凝膠時間以保證邊緣清晰;改進上樣技巧或選擇泡染法染色。