產品簡介(粉劑)
Ficoll 400是由蔗糖和環氧氯丙烷共聚而成的一種高度分支化的聚合物。 Ficoll 400是完全非離子型合成蔗糖聚合物。。 由于其含有豐富的羥基,Ficoll 400具有很強的親水性和水溶性。 Ficoll 400最常見的應用是作為密度梯度介質,用于真核細胞、細胞器和細菌細胞的分離和分離。密度范圍可達1.2 g/ml。 它還被用于一系列其他應用中。
產品應用
本品用于分離人外周血淋巴細胞由FICOLL配制而成,全過程樣本、試劑及實驗環境均需在20±2℃的無菌條件下進行。為獲得最佳的實驗結果,最好在取血2h內進行實驗,血液存放時間越長,細胞分離效果越差。血液放置超過6h后分離效果更差甚至不能達到分離目的。因血液樣本的個體差異及血液粘度不同,需調整離心力及離心時間,建議離心力最大不超過1200g。
產品特點
由于高分子量和低含量的透析性材料,Ficoll對細胞膜的滲透性比蔗糖低得多。 因此,細胞在梯度Ficoll下的聚集密度要低于梯度蔗糖。Ficoll由于其低膜滲透性和低滲透壓,通常能較好地保存細胞功能和形態。
外觀與性狀:白色粉末
熔點:300°C
溶解性:易溶于水
保存條件:室溫
包裝:5g 25g 100g in poly bottle
溶液制備
水的濃度可達到50% (w/v)。 Ficoll應在持續攪拌下緩慢加入。其1g溶于10ml去離子水中時呈透明到微模糊,無色到淡黃色的溶液。 Ficoll在堿性和中性溶液中穩定。當pH值低于3時,它會迅速水解,尤其是在高溫下。 Ficoll可在110oC的中性pH下高壓滅菌30分鐘。 應避免使用強氧化性和還原性試劑。
FS1141R-100ml即用型溶液簡介
保存及運輸:+4~30℃避光保存,至少2年有效。本品易染菌,需無菌條件下操作,啟封后置常溫保存,低溫存儲易出現白色結晶,影響分離效果。運輸:室溫運輸,
使用方法
1-1. 取一支15mL離心管,血液樣本量為3~10mL時,應加入與血液樣本等量的分離液。
1-2. 用吸管小心吸取血液樣本加于分離液之液面上:
血液樣本量 | 離心力 | 離心時間 |
≤3ml | 400~650g | 15~25min |
3~10mL | 500~950g | 20~30min |
10~20mL | 500~1100g | 20~30min |
【注】:根據血液樣本量確定離心條件,血液樣本量越多,離心力越大,離心時間越長,具體離心條件需客戶自行摸索,以達到最佳分離效果。
1-3. 離心后,此時離心管中由上至下分為四層。第一層為血漿層。第二層為環狀乳白色淋巴細胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細胞層。
1-4. 用吸管小心吸取第二層環狀乳白色淋巴細胞層到另一15mL離心管中,向所得離心管中加入10mL清洗液混勻細胞。
250g,離心10min。
1-5. 棄上清。
1-6. 用吸管以5mL緩沖清洗液重懸所得細胞。
1-7. 250g,離心10min。
1-8. 重復1-5、1-6、1-7,棄上清后以0.5mL后續實驗所需相應液體重懸細胞。
注意事項
1)本實驗最好不要使用高聚合材質(如聚苯乙烯)的塑料制品,應使用無靜電、低靜電離心管及未經堿處理過后的玻璃制品,因為靜電作用將導致細胞貼壁、堿處理的玻璃表面會變成毛面,影響細胞分離效果。
2)吸取過多的淋巴細胞層及分離液層會導致分離液交界處的粒細胞被吸出從而使混雜的粒細胞數量增加。
3)吸取過多的淋巴細胞層上層溶液會導致血漿蛋白及血小板混雜。
4)當血液樣本粘度過高需稀釋時,最優稀釋方法:將血液與樣本稀釋。注:不當的稀釋方法會降低細胞得率及活性。如血液樣本經過稀釋則分離過程中需適當降低離心力和離心時間。
5)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。