產(chǎn)品描述
固定劑和破膜劑通常用于細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色前對細(xì)胞膜的處理。固定劑起穩(wěn)定細(xì)胞膜、保持細(xì)胞膜表面抗體與抗原結(jié)合的作用,破膜劑使流動的、完整的細(xì)胞膜產(chǎn)生小孔以利于抗體進入細(xì)胞。使用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)抗原時,先對待測細(xì)胞進行固定、破膜處理后,再加入相應(yīng)抗體或檢測試劑,孵育一定時間后即可上機分析。
本品為即用型的固定劑(Fixation Buffer),優(yōu)化配方降低背景,從而最大程度提高信噪比。
使用方法
1. 收獲待測細(xì)胞(推薦10的5次方或6次方),1000rpm離心10min,棄上清;2. 加入500μl 4℃預(yù)冷的固定劑;3. 室溫避光孵育10min;4. 1000 rpm離心10min;
5. 棄上清,加入PBS洗一次,1000 rpm離心10min;6. 棄上清,加入1.5 ml破膜劑;7. 室溫孵育10-15min;
8. 1000 rpm離心5min;9. 棄上清,加入適量破膜劑重懸細(xì)胞;10. 加入檢測抗體染色后,用流式細(xì)胞儀進行分析。