產品簡介:
纖維素酶R-10(Cellulase R-10),也稱為Cellulase "Onozuka" R-10,來源于綠色木霉(Trichoderma viride)。纖維素酶R-10是一種酶混合物,包括纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶和蛋白酶。通常與離析酶R-10(Macerozyme R-10)(貨號:FS1256)聯合使用降解植物細胞壁以制備原生質體。
本品以凍干粉形式提供,含>10,000 U/g纖維素酶活性。一個活力單位的纖維素酶能夠降解羧甲基纖維素釋放1 µmole葡萄糖。纖維素酶活性可能被糖類化合物如葡萄糖或纖維二糖所抑制。
酶溶液的制備
【注意】:以下酶溶液的制備體系包括酶的使用濃度僅作為參考,用戶可根據具體實驗條件或參考文獻來做調整。
1–1.5% 纖維素酶R-10(0.1-0.15 g/10ml)
0.2–0.4% 離析酶R-10(0.02-0.04 g/10ml)
0.4M 甘露醇(0.8M 甘露醇儲存液)
20mM KCl(2M KCl儲存液)
20mM MES, pH 5.7(0.2M MES, pH 5.7儲存液)
于55℃加熱上述酶溶液10min(目的是為了失活蛋白酶并提高酶溶解性),冷卻至室溫后再加入:
10mM CaCl2(1M CaCl2儲存液)
5mM β-Mercaptoethanol (β-ME)(可選)
0.1% BSA(10% BSA儲存液,無菌)(可選)
配制好的酶溶液是透明的,可用低吸附的0.45μm濾膜過濾后,酶溶液(pH 5-7)于2-8℃穩定保存24h。建議根據實際需要來配置酶溶液,并盡快用完