英文名 | PicoGreen dsDNA Reagent | ||
產品編號 | FS1368 | ||
產品分類 | 熒光探針及染色 | ||
純度 | N/A | 儲存條件 | 2-8℃避光保存,亦可置于-20℃避光保存。至少1年有效。 |
產品描述
Picogreen是一種極為靈敏的熒光核酸染料,(激發和發射波長Ex/Em:488/520nm)常用于雙鏈DNA的定量檢測。歷來DNA濃度的測定在cDNA文庫的構建,DNA亞克隆、PCR產物的估測等領域中具有重要意義,疫苗等生物制品中殘留微量DNA的檢測更是直接關系到人類的健康。
Picogreen dsDNA定量檢測:Picogreen僅在與DNA雙鏈結合后才發出熒光,且所產生的熒光與DNA濃度呈正比,在存在ssDNA、RNA和單體核苷酸的條件下,可以選擇性地檢測低至25pg/ml的dsDNA。該分析在三個數量級范圍內呈線性,且幾乎無序列依賴性,可以精確地測量多個來源的DNA,包括基因組DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR擴增產物。
相比傳統的方法,Picogreen dsDNA Quantitation Reagent定量具有以下優勢:
①靈敏度高:數量級較UV吸光讀數更敏感,可節省寶貴的樣品;
②特異性強:在等摩爾的RNA存在的條件下,對dsDNA具有特異性;
③耐受性好:耐受較高濃度的鹽、尿素、乙醇、氯仿、去垢劑、蛋白或瓊脂糖,可以直接定量PCR擴增產物而無需從反應混合物中純化DNA。
④易于使用——只需在樣品中加入染料,等待5分鐘,然后讀數即可,且適用于96和384孔板;與大多數基于熒光的酶標儀和熒光計兼容。
⑤適用范圍廣:可適用于PCR的分析、芯片樣品、DNA損傷分析、酶活性分析、基因組DNA定量以及復雜混合物中dsDNA的檢測和病毒DNA定量等多種領域。
我司可根據用戶需求提供多種規格的Picogreen雙鏈DNA檢測試劑(PicoGreen dsDNA Reagent),本品以溶于DMSO的母液形式提供,濃度為0.1mg/ml。也有提供成套試劑盒(CAS#FSF0034)試劑盒內若按照2ml反應體系來計算(比色皿),10×100 µL規格可做200次反應;若按照200µl反應體系來計算(96孔板),10×100 µL規格可做2000次反應;單次反應體系取決于熒光檢測儀器。
保存與運輸方法
保存:2-8℃避光保存,亦可置于-20℃避光保存。至少1年有效。
運輸:冰袋運輸。
應用示例(熒光定量):1~100ng( DNA ng/ul)
應用示例(picogreen的熒光染色)
文獻來源1):Ho SS, Zhang WY, Tan NY, Khatoo M, Suter MA, Tripathi S, Cheung FS, Lim WK, Tan PH, Ngeow J, Gasser S. The DNA Structure-Specific Endonuclease MUS81 Mediates DNA Sensor STING-Dependent Host Rejection of Prostate Cancer Cells. Immunity. 2016 May 17;44(5):1177-89. doi: 10.1016/j.immuni.2016.04.010. Epub 2016 May 10. PMID: 27178469.
Fig. Genome-Derived DNA Accumulates in the Cytosol of Prostate Cancer Cells
(A) Murine TRAMP-C2, human DU145 and human PC-3 prostate cancer cells were labeled with antibodies against dsDNA (red) and the mitochondrial marker COX IV (green) in the presence of DAPI (blue). Z stacks were acquired by confocal microscopy and 3D iso-surface rendered using Imaris software to exclude mitochondrial and nuclear DNA.
(B) TRAMP-C2, DU145, and PC-3 cells were labeled with 3 ml/ml of the dsDNA-specific dye PicoGreen (green) for 1 hr and with 100 nM mitochondria-specific dye MitoTracker (red) for 30 min. Z stacks were acquired by confocal microscopy and 3D iso-surface rendered using Imaris software to exclude mitochondrial DNA.
附表 PicoGreen定量耐受的污染物列表
物質名稱 | 最大耐受濃度 | 信號變化百分比 |
Salts | ||
Ammonium acetate | 50 mM | 3% decrease |
Sodium acetate | 30 mM | 3% increase |
Sodium chloride | 200 mM | 30% decrease |
Zinc chloride | 5 mM | 8% decrease |
Magnesium chloride | 50 mM | 33% decrease |
Urea | 2 M | 9% increase |
Organic Solvents | ||
Phenol | 0.1% | 13% increase |
Ethanol | 10% | 12% increase |
Chloroform | 2% | 14% increase |
Detergents | ||
Sodium dodecyl sulfate | 0.01% | 1% decrease |
Triton X-100 | 0.1% | 7% increase |
Proteins | ||
Bovine serum albumin | 2% | 16% decrease |
IgG | 0.1% | 19% increase |
Other Compounds | ||
Polyethylene glycol | 2% | 8% increase |
Agarose | 0.1% | 4% increase |
注意事項
1) Picogreen含DMSO(已知有毒試劑),操作時請注意防護。
2) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。