英文名 | SYTOX Green Nucleic Acid Stain (1 mM in DMSO) | ||
產(chǎn)品編號(hào) | FS4001 | ||
產(chǎn)品分類 | 熒光探針及染色 | ||
純度 | 1 mM in DMSO | 儲(chǔ)存條件 | -20℃,避光 |
產(chǎn)品簡介
SYTOX 綠色死細(xì)胞核酸染料( Ex/Em: 502/525 nm, bound to DNA)是一種可輕易穿過受損細(xì)胞質(zhì)膜而不能透過活細(xì)胞質(zhì)膜的綠色核酸染料,其在于核酸結(jié)合之后熒光強(qiáng)度會(huì)得到超過500倍的顯著增強(qiáng)。SYTOX綠色死細(xì)胞核酸染料可以用于染死的真核細(xì)胞的RNA和DNA,在革蘭氏細(xì)菌中同樣也適用。使用者可以利用氬激光激發(fā)器的488nm(或者其他任何帶有 450-490nm 激發(fā)光源的激發(fā)器)激發(fā)染料。 SYTOX綠色死細(xì)胞核酸染料可用于多色熒光分析,在不同的實(shí)驗(yàn)應(yīng)用中染固定細(xì)胞的核酸,如,熒光顯微鏡、熒光酶標(biāo)儀,流式細(xì)胞儀上。
本品以DMSO儲(chǔ)存液形式提供,濃度為1mM。只需用合適的生理緩沖液稀釋到工作濃度進(jìn)行簡單孵育即可。適用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞、革蘭氏陽性和革蘭氏陰性菌。
保存與運(yùn)輸方法:-20℃避光保存,有效期一年。 冰袋運(yùn)輸。
產(chǎn)品特性
同義名:SYTOX Green dye;SYTOX綠色熒光染料;死細(xì)胞綠菁 SYTOX Green;SYTOX 綠色死細(xì)胞核酸染料
熒光特征:EX/Em=502/525nm(與DNA結(jié)合);
圖1.SYTOX Green與DNA結(jié)合的熒光激發(fā)和發(fā)射光譜。于10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 7.5的反應(yīng)體系內(nèi),將1個(gè)染料分子與50個(gè)DNA堿基對結(jié)合之后檢測所得的光譜。
使用方法(以下步驟僅用作示例以指導(dǎo)科研人員開展自身細(xì)菌樣本的染色。)
基于實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)和發(fā)表方法,建議使用廣譜的染色濃度來開展使用,并且根據(jù)自身的細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)體系來優(yōu)化摸索出最佳的工作濃度(見表2)。
使用塑料管來稀釋SYTOX染料,由于稀釋后的染料會(huì)粘附到玻璃上。總的來說,用不含磷酸鹽的緩沖液來染色能得到最好的結(jié)果。塑料或玻璃器皿上殘留的去污劑也有可能影響許多細(xì)胞或有機(jī)體的真實(shí)染色,導(dǎo)致在含或不含細(xì)胞的溶液中都能看到發(fā)明亮熒光的材料。確保用溫和去污劑來清洗玻璃器皿,用熱自來水完全沖洗干凈,最后用去離子水清洗數(shù)次。
表2. SYTOX染色不同細(xì)胞的建議工作濃度 |
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細(xì)胞類型 |
SYTOX濃度 |
孵育條件 |
細(xì)菌細(xì)胞 |
0.5-5 µM |
渦旋混勻,之后孵育5 min |
酵母 |
1.0-50µM |
孵育10min以上,周期性搖晃管子 |
其他真核細(xì)胞 |
10 nM–1 µM |
孵育10 min以上 |
①離心收集細(xì)胞,用生理鹽溶液或水重懸細(xì)胞。貼壁細(xì)胞(比如:哺乳動(dòng)物細(xì)胞)可能在蓋玻個(gè)染料濃度,片上原位染色。使用表2內(nèi)建議的工作濃度進(jìn)行染色。初次實(shí)驗(yàn),建議在建議濃度范圍內(nèi)做多,以確定能得到最佳染色的工作濃度。需要注意:生長培養(yǎng)基、細(xì)胞密度、是否存在其它細(xì)胞、和其它因素都可能影響染色。
②染色的真核細(xì)胞通常顯示出彌散的細(xì)胞漿染色和細(xì)胞核染色,特別是經(jīng)常看到明亮的核內(nèi)小體染色。由于此染料具細(xì)胞膜滲透性,且中性pH下帶凈正電荷,也有可能染線粒體。活酵母菌內(nèi)主要是線粒體染色。
注意事項(xiàng)
1) 熒光探針均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
5) 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
相關(guān)產(chǎn)品
貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
FS4000 |
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20µl |
FS4001 |
SYTOX Green Nucleic Acid Stain (1 mM in DMSO) |
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